近日，根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定，农业农村部批准中国农业大学、哈尔滨国生生物科技股份有限公司、北京亿森宝生物科技有限公司、郑州中道生物技术有限公司、北京纳百生物科技有限公司等5家单位申报的鸡毒支原体ELISA抗体检测试剂盒为新兽药，核发《新兽药注册证书》，具体详见农业农村部公告第441号。
新兽药的基本情况
【兽药名称】鸡毒支原体ELISA抗体检测试剂盒
【注册分类】二类
【新兽药注册证书号】（2021）新兽药证字36号
【监测期】4年
【研制单位】中国农业大学、哈尔滨国生生物科技股份有限公司、北京亿森宝生物科技有限公司、郑州中道生物技术有限公司、北京纳百生物科技有限公司
【主要成份与含量】
【作用与用途】用于检测鸡血清中的鸡毒支原体抗体。
【用法与判定】
1 用法
1.1 样品准备 取鸡全血，待血液凝固后，以3000r/min离心10分钟，收集上清。也可采集血液，待凝固后自然析出血清，要求血清清亮，无溶血。
1.2 配液(应现用现配)
1.2.1 洗涤液的配制 将浓缩洗涤液(10x)应恢复至室温，并摇动使沉淀溶解(可在37℃水浴中加热溶解5～10分钟)。然后使用去离子水或蒸馏水稀释10倍。
1.2.2 样品稀释液的配制 将样品稀释粉倒至15ml离心管中，加入PBS溶液(pH 7.2)10ml，充分混匀，4℃存放，备用。
1.2.3 酶结合物的配制 用PBS溶液(pH 7.2)将酶结合物(100x)进行1︰100稀释。
1.3 样品稀释 用样品稀释液将所有待检血清、阳性对照血清和阴性对照血清进行1︰500稀释。
1.4 样品检测
1.4.1 准备 使用前将试剂盒恢复至室温。液体试剂应轻轻振荡混匀。
1.4.2 编号 取出抗原包被板(根据样品多少，可拆开分多次使用)，在记录本上记录样品的位置。
1.4.3 加样 将阳性对照血清、阴性对照血清和待检血清依次加入抗原包被板，每孔100μl，每次检测阳性对照血清、阴性对照血清各加2孔，待检血清做1个重复。轻轻混匀孔中样品(勿溢出)，用封板膜封好，置37℃孵育1小时。
1.4.4 洗板 弃去孔中液体，每孔加入稀释好的洗涤液300μl，浸泡3分钟，弃去洗涤液。重复洗板4次，最后一次洗涤后弃去洗涤液，并在吸水纸上拍干。
1.4.5 加酶 每孔加入稀释好的酶结合物100μl，用封板膜封好，置37℃孵育1小时。
1.4.6 洗板 弃去孔中液体，重复步骤1.4.4。
1.4.7 显色 将底物A液和底物B液按1︰1比例混合后，每孔加入混合液100μl。盖上封板膜，置37℃避光显色10分钟。
1.4.8 终止 每孔加入终止液50μl(10分钟内测定结果)。
1.4.9 测定 设定酶标仪波长于450nm处，用空白孔调零后测定各孔OD值。
2 判定
2.1 试验有效性判定 阴性对照平均值(NC )≤0.15，且阳性对照平均值(PC )减去阴性对照平均值(NC )≥0.15，判定试验有效。
2.2 判定 当样品S/P≥0.67，判为阳性；S/P＜0.67，判为阴性。
【注意事项】
(1) 试剂盒严禁冻结。
(2) 试剂盒使用前，各试剂和血清样品应恢复至室温，使用后放回2℃～8℃保存。未用完的酶标板条须与干燥剂一起用自封袋密封，置2℃～8℃保存。
(3) 不同批次的试剂盒组分不得混用，不同试剂使用时应防止交叉污染。
(4) 底物和终止液不能暴露于强光或接触抗氧化剂。
(5) 使用终止液及底物B液时应注意安全，避免直接接触，如溅到皮肤、眼睛上，应立即用大量清水冲洗。
(6) 所有血清样品应全部稀释完成后，再加到抗原包被板上，以保持反应条件尽可能一致。
(7) 浓缩洗涤液如有结晶，应37℃水浴使其溶解后再使用。
(8) 移液时，应尽量准确，防止气泡产生。
(9) 所有废弃物应进行无害化处理。
【规格】 96孔/板，1板/盒。
【贮藏与有效期】 2℃～8℃保存，有效期为12个月。
来源：农业农村部
