近日，根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定，农业农村部批准北京金诺百泰生物技术有限公司、中国农业大学申报的非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒为新兽药，核发《新兽药注册证书》，具体详见农业农村部公告第463号。
新兽药的基本情况
【兽药名称】非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒
【注册分类】二类
【新兽药注册证书号】（2021）新兽药证字53号
【监测期】4年
【研制单位】北京金诺百泰生物技术有限公司、中国农业大学
【主要成分与含量】
【作用与用途】 用于检测猪血清、血浆中的非洲猪瘟病毒抗体。
【用法与判定】
1 用法
1.1 1倍洗涤液的配制 10倍洗涤液使用超纯水进行10倍稀释，如配制100ml 1倍洗涤液需10ml 10倍洗涤液加90ml超纯水（dH2O）。稀释后的洗涤液置2℃～8℃可保存7日。
1.2 样品准备
1.2.1 尽量使用新鲜采集的血清或血浆样品。
1.2.2 不能用于检测严重污染或严重溶血的样品。
1.2.3 如果血清或血浆样品浑浊，需离心后取上清进行检测。
1.2.4 检测样品可在2℃～8℃保存5日，长时间保存需要转移至-20℃或更低温环境中。
1.3 样品稀释 取样品进行50倍稀释。在稀释板中每孔加入样品稀释液245μl，各相应孔分别加入血清或血浆样品5μl，充分混匀。禁止稀释阳性对照血清（PC）与阴性对照血清（NC）。
1.4 操作步骤
1.4.1 将所有组分从试剂盒中取出，在恒温箱（25℃±3℃）中放置至少60分钟。
1.4.2 向抗原包被板孔中加入稀释后的样品100μl。
1.4.3 参照微孔板加样位置示例图向指定孔中分别加入未稀释的阴性对照血清（NC）和阳性对照血清（PC）100μl，各2孔。
1.4.4 盖上封板膜，25℃（±3℃）下孵育30分钟（±2分钟）。
1.4.5 用ELISA洗板机或微量移液器洗板，弃去孔中液体，每孔加入1倍洗涤液300μl，洗涤3次。最后一次洗涤后将酶标板在吸水纸上轻轻拍干，严禁各步骤之间孔板出现干燥情况。
1.4.6 每孔加入酶标抗体100μl。
警告：倒出瓶的酶标抗体禁止再次装入瓶中，以防止HRP酶受污染而使其活性降低。
1.4.7 盖上封板膜，25℃（±3℃）下孵育30分钟（±2分钟）。
1.4.8 重复步骤1.4.5。
1.4.9 每孔中加入TMB底物液100μl。
1.4.10 盖上封板膜，25℃（±3℃）下孵育15分钟（±1分钟）。
1.4.11 每孔中加入终止液50μl，终止酶促反应。
1.4.12 用酶标仪测定450nm波长处吸光度值。
2 判定
2.1 计算方法
2.2 试验成立条件 阳性对照OD450nm平均值＞0.85；阴性对照OD450nm平均值＜0.15；该检验结果判为有效。如果检测结果不在界定范围则需要重新进行检测。
2.3 判定标准
2.3.1 当样品S/P值≥0.4，判为阳性。
2.3.2 当样品0.3＜S/P值＜0.4，判为可疑。可疑样品建议重检，二次可疑判为阳性。
2.3.3 当样品S/P值≤0.3，判为阴性。
【注意事项】 （1）试剂盒贮藏条件为2℃～8℃。开启前应确认其批号及有效期。
（2）过期产品请勿使用，不同批号的试剂盒组分禁止混用。
（3）试剂盒使用前各组分试剂均需于恒温箱（25℃±3℃）中放置至少60分钟，使用后放置2℃～8℃保存。
（4）应避免检测过程中污染试剂盒中的试剂。
（5）试验所用仪器（如：微量移液器、恒温培养箱、ELISA洗板机、酶标仪）需要在使用前进行功能检查，确保其可用性、准确性。
（6）所有试剂严禁接触皮肤和粘膜。检测结束后所用耗材需按国家规定进行无害化处理。
（7）移液器吸头必须一次一换。
（8）未用的微孔板条可装入密封袋中2℃～8℃保存。
（9）试剂盒中各组分容器只针对该组分使用，不可二次利用。
【规格】 （1）96孔/盒 （2）192孔/盒 （3）480孔/盒
【贮藏与有效期】 2℃～8℃保存，有效期为12个月。
来源：大畜牧综合农业农村部
